深圳市恒昊生物科技有限公司

脊髓灰质炎病毒 抗体检测试剂盒（酶联免疫法）

使用说明书（48T/96T）

[脊髓灰质炎病毒包括]脊髓灰质炎病毒 I 型、II 型、III 型、I-III 型。

[原理]

本试剂盒采用亲和素-生物素化进口 PV 抗原预包被板 ELISA 原理，检测人血清/血浆中存在的脊髓灰质炎病毒 IgG 抗体。并配以酶标记抗人 IgG 单克隆抗体作为标记物。加入底物 TMB 显色后终止反应，在 450nm 波长测各孔 OD 值，OD 值的大小与待检抗体含量成正比。生物素系统（biotin-avidin system）的

稳固级联放大作用，使试剂的特异性、灵敏度、稳定性极大地提高是本试剂含有的独特优点。

[用途]

本试剂盒用于检测人血清/血浆中存在的脊髓灰质炎病毒 IgG 抗体。

[试剂盒组成]

1、生物素化抗原预包被板 1 块（48T/96T）

2、阴、阳性对照 各 1 瓶（直接使用）

3、标本稀释液1 瓶（11ml/48T；22ml/96T）

4、酶结合物1 瓶（5/12ml，直接使用）

5、30X 浓缩洗液1 瓶（10/20ml，加蒸馏水 1：30 稀释使用）

6、显示剂 A、B 液 各 1 瓶（3/5ml）

7、终止液（2M H2SO4） 1 瓶（3/5ml）

[操作步骤]

1、将试剂盒平衡至室温后取出反应板拆封后置于板架上。

2、样本稀释：用标本稀释液以 1∶101（5ul-500ul）稀释标本。吸取已稀释待检标本 100ul 于反应孔

中，设阴、阳性对照（各 100ul/孔）及空白对照一孔（加 100ul 标本稀释液）轻拍混匀。37℃温育

30 分钟。

3、将浓缩洗涤液用蒸馏水做 30 倍稀释。甩去孔内液体，用洗涤液洗板 3 次并在吸水纸上拍干。

4、加酶结合物：每孔 2 滴，混匀后置 37℃温育 30分钟，同上法洗涤 3 次并拍干。

5、显色：每孔加显色剂 A、B 各一滴，轻拍混匀（或震荡器混匀）后置 37℃10 分钟。

[结果判定]

1. 目测：在白色背景下观察各孔显色情况，蓝色者为阳性，无色者为阴性。

2. 酶标仪测定：每孔加终止液一滴，混匀后在 450nm下测定各孔 O.D 值。

① P/N=标本 O.D 值 / 阴性对照 O.D 值。② P/N≥2.1 为阳性；③ 1.5 ≤ P/N<2.1 为 可 疑 标 本 ; P/N<1.5 为 阴

性。④ 阴性对照(NC)小于 0.10 时以 0.10 计, 大于 0.1小于 0.21 时以实际 O.D 值计算;若大于 0.21时,实验可能出现了较大误差,需重复实验。⑤ 阳性对照(PC)值通常≥0.4,实验成立,否则需重做。

[注意事项]

1、微孔板须密封防潮，从冷藏环境中取出时，应置室温平衡至潮气尽干后方可开启使用，余者封存置 2-8℃。

2、滴加试剂前应将液体翻转数次混匀，滴加时保持瓶身垂直。

3、洗涤时每孔均须加满，防止孔内有游离酶不能洗净。

4、试剂置 2-8℃存放，不能冻结，有效期 10 个月。

5、避免用溶血、混浊或脂血标本。

6、最好用新鲜标本，如需保存，可于 2-8℃冷藏 48小时或-20℃冻存 4 周（样本应避光）。