深圳市恒昊生物科技有限公司

狂犬病毒 抗体检测试剂盒（酶联免疫法）

使 用 说 明（96T/48T）

[原理]

本试剂盒采用亲和素-生物素化 Ra 纯化抗原预包被板 ELISA 原理，检测人血清/血浆中存在的狂犬病毒 IgG 抗体，并配以酶标记抗人 IgG 单克隆抗体作

为标记物。加入底物 TMB 显色后终止反应，在 450nm波长测各孔 O.D 值，O.D 值的大小与待检抗体含量成正比。生物素系统（biotin-avidin system）的稳固级联放大作用，使试剂的特异性、灵敏度、稳定性极大地提高是本试剂含有的独特优点。

[用途]试剂盒用于定性检测人血清/血浆中的狂犬病毒（RABIES VIRUS） IgG 抗体，对因动物咬伤而致感染了狂犬病毒的诊断、流行病学调研和疫苗监测有重要意义。

适应范围：

动物咬伤致狂犬病毒感染的诊断和监测。

疫苗接种后效能监测。

流行病学调研和既往感染的诊断。

[试剂盒组成]

1、生物素化抗原预包被板 1 块（8X12/4X12）

2、阴性对照 1 瓶

3、阳性对照 1 瓶

4、标本稀释液 1 瓶（20/10 ml，直接使用）

5、酶结合物 1 瓶（12/5ml，直接使用）

6、30X 浓缩洗液1 瓶（20/10ml，加蒸馏水 1：30 稀释使用）

7、显示剂 A、B 液 各 1 瓶（5/3ml）

8、终止液（2M H2SO4） 1 瓶（5/3ml）

9、说明书 1 份

[操作步骤]

1. 将试剂盒平衡至室温后取出反应板拆封。

2. 加 样 ： 将 待 检 标 本 用 标 本 稀 释 液 作 1 ： 1012ul—200ul）稀释，分别加待检标本及阴阳性对照 100ul 各一孔于反应板中，设空白对照一孔（加100ul 标本稀释液），轻拍混匀。

3. 37℃温育 30 分钟。甩去孔内液体，用洗涤液洗板3 次并在吸水纸上拍干。

4. 加酶结合物：每孔 2 滴，混匀后置 37℃温育 30分钟。同上法洗涤 3 次并拍干。

5. 显色：每孔加显色剂 A、B 各一滴，轻拍混匀（或震荡器混匀）后置 37℃10 分钟。[结果判断]

1. 目测：在白色背景下观察各孔显色情况，兰色者为阳性，无色者为阴性。

2. 酶标仪测定：每孔加终止液一滴，混匀后在 450nm下测定各孔 O.D 值。1 P/N=标本 O.D 值/ 阴性对照 O.D 值。2 P/N≥2.1 为阳性；

3 1.5≤P/N<2.1 为可疑标本; P/N<1.5 为阴性。

4 阴性对照(NC)小于 0.10 时以 0.10 计, 大于0.1 小于 0.21 时以实际 O.D 值计算;若大于0.21 时,实验可能出现了较大误差,需重复实

验。

5 阳性对照(PC)值通常≥0.4,实验成立,否则需重做。

[注意事项]

1. 微孔板须密封防潮，从冷藏环境中取出时，应置室温平衡至潮气尽干后方可开启使用，余者封存

置 2-8℃。

2. 滴加试剂前应将液体翻转数次混匀，滴加时保持瓶身垂直。

3. 洗涤时每孔均须加满，防止孔内有游离酶不能洗净。

4. 试剂置 2-8℃存放，不能冻结，有效期 10 个月。

5. 避免用溶血、混浊或脂血标本。

6. 最好用新鲜标本，如需保存，可于 2-8℃冷藏 48小时或-20℃冻存 4 周（样本应避光）。